細胞培養的成功取決於精確性，但它卻受到長期誤解的困擾。儘管技術取得了進步，但誤解仍然阻礙著研究進展。從培養基選擇、FBS 優化到污染控制，這些誤解可能導致結果不可靠、資源浪費和資料完整性受損。 

在這篇部落格中，我們將揭穿六個常見的細胞培養迷思。我們將探索這些誤解背後的科學原理，並提供優化細胞培養實踐的實用技巧。無論您是經驗豐富的研究人員還是實驗室新手，了解這些事實都將使您能夠獲得更準確和可重複的結果。 

讓我們一起消除誤解，提升您的細胞培養遊戲水平。

迷思 1：所有基礎培養基都含有相同的營養成分 

現實： 這種誤解通常源自於這樣的信念：基本細胞培養基，例如杜爾貝科改良伊格爾培養基(DMEM) 或羅斯威爾公園紀念研究所(RPMI) 1640，普遍足以滿足所有細胞類型的需要。然而，這遠非事實。細胞生物學的複雜性決定了不同的細胞類型有不同的營養和環境需求。來自不同組織或物種的細胞有不同的代謝需求，即使在同一組織內，不同的細胞類型也可能有特殊的需求。

例如，雖然 DMEM 和 RPMI 都是細胞營養豐富的環境，但它們在組成和應用方面有明顯差異：

• DMEM（杜爾貝科改良 Eagle 培養基）: 此培養基提供更高的葡萄糖濃度、更高的胺基酸含量和更高的維生素濃度。這些特性使 DMEM 適合快速生長的細胞系和多種細胞類型的生長。更高的營養利用率支持快速增殖和強大的細胞代謝。 
• RPMI 1640（羅斯威爾公園紀念研究所培養基）: 相較之下，RPMI 的葡萄糖濃度較低，胺基酸含量較低，維生素濃度較低。這種培養基通常用於生長較慢的細胞和具有獨特要求的特定細胞類型，例如淋巴細胞和某些癌細胞系。 RPMI 的配方專為支持這些細胞的代謝和生長需求而定制，這些細胞可能無法在營養更密集的 DMEM 環境中茁壯成長。 

此外，其他基礎培養基配方，例如 F-12 營養混合物、Iscove's 改良 Dulbecco 培養基 (IMDM) 和最低必需培養基 (MEM)，每種都有獨特的成分，旨在滿足不同細胞類型的特定需求。例如，F-12 常用於無血清培養，含有豐富的營養混合物，適合多種細胞類型，而 IMDM 則專為具有廣泛營養需求的高度增殖細胞而設計。 

選擇正確的基礎培養基 對於優化細胞培養條件和確保準確且可重複的實驗結果至關重要。研究人員在選擇基礎培養基時必須考慮其細胞類型的特定代謝和生長需求，並認識到 沒有一種配方對所有細胞都是普遍最佳的.

迷思 2：酚紅只是一種 pH 指示劑

現實： 雖然酚紅通常被稱為細胞培養基中的 pH 指示劑，但其作用和影響超出了簡單的 pH 監測範圍。將酚紅添加到細胞培養基中，直觀地發出 pH 值的變化訊號，這對於維持細胞生長的最佳條件至關重要。然而，這種染料會對細胞和實驗結果產生額外的影響。 

1. 污染指標： 酚紅有助於檢測污染。顏色從紅色（中性 pH 值）快速變為黃色（酸性 pH 值）或紫色（鹼性 pH 值）可能表示細菌或真菌污染，這通常會改變介質的 pH 值。 

2. 潛在的雌激素活性： 酚紅具有弱雌激素活性。它可以透過與某些細胞類型上的雌激素受體結合來模擬雌激素的作用，這可能會影響細胞行為，特別是在乳癌細胞係等激素敏感細胞中。這可能會混淆涉及雌激素受體訊號路徑的實驗。 

3. 細胞增生和分化： 酚紅的存在可以影響細胞增生和分化。一些研究表明，酚紅可以影響某些細胞類型的生長速率和分化模式，可能會改變實驗結果。 

4. 替代指標： 研究激素敏感細胞或需要精確表型表徵的細胞的研究人員通常選擇不含酚紅的培養基。這有助於消除酚紅的任何潛在幹擾，確保觀察到的效果僅歸因於實驗處理。 

5. 對螢光和光學測定的干擾： 由於其固有顏色，酚紅會幹擾基於螢光的測定和吸光度測量。這可能導致讀數和數據解釋不準確，特別是在涉及分光光度法或螢光顯微鏡的實驗中。使用不含酚紅的培養基或校正其在檢測中的存在可以幫助緩解這個問題。 

6. 對 pH 調節的影響： 儘管酚紅可作為 pH 指示劑，但它不能取代細胞培養中適當的 pH 調節。保持正確的 CO₂ 培養基的水平和緩衝能力對於細胞健康和實驗一致性至關重要。僅依靠酚紅來監測 pH 值可能會產生誤導，特別是在培養基成分沒有適當平衡的情況下。 

雖然酚紅是監測細胞培養基 pH 變化的重要工具，但對細胞行為和實驗結果的影響也不容小覷。研究人員必須意識到這些潛在影響，並在必要時考慮使用不含酚紅的培養基，以確保結果準確且可重複。 

您可以將碳酸氫鈉（細胞培養基中的緩衝劑）添加到生理範圍內的 pH 值，並與培養箱中的 CO2 建立平衡，確保對細胞健康和功能至關重要的穩定的 pH 條件。 HEPES 也經常作為緩衝劑添加到細胞培養基中，以維持穩定的 pH 值，特別是在二氧化碳水平不受嚴格控制的環境中。

迷思 3：在培養基中添加更多抗生素可以防止污染。

現實： 細胞培養中一個常見的誤解是增加生長培養基中抗生素的含量將提供更強的防止污染的保護。這種信念通常源自於保護有價值的細胞培養物的願望。雖然抗生素可以有效預防某些類型的污染，但過度使用可能會導致一些有害後果。 

1. 抗生素抗藥性： 抗生素的過度和濫用會導致抗生素抗藥性微生物的選擇。這些抗藥性菌株會污染細胞培養物，導致抗生素失效。隨著時間的推移，這可能會導致難以根除的持續污染問題。 

2. 錯誤的安全感： 抗生素可以抑制支原體等敏感微生物的生長，進而產生虛假的安全感。潛在的污染問題可能仍未被發現，並可能傳播到其他文化。定期支原體檢測和警覺監測對於確保培養完整性至關重要。 

3. 幹擾細胞代謝： 有些抗生素會幹擾細胞代謝和生長，導致實驗結果不準確。例如，抗生素可能會影響蛋白質合成、細胞分裂和代謝途徑等細胞過程，從而損害實驗數據的有效性。 

4. 抗藥性細胞變異的選擇： 持續接觸抗生素可以選擇培養物中的抗生素抗性細胞變異。這些抗藥性細胞可能改變了表型和行為，可能影響實驗結果和重現性。 

5. 對實驗完整性的影響： 對抗生素的依賴可能掩蓋不良的無菌技術和實驗室實踐。正確的無菌技術是防止污染的第一道防線，對於維持細胞培養的完整性至關重要。

採取綜合方法預防污染至關重要，而不是僅依賴抗生素。這包括： 

• 實踐無菌技術： 在所有細胞培養過程中始終採用嚴格的無菌技術，以盡量減少污染風險。 

• 定期設備消毒： 確保所有設備、試劑和工作空間定期消毒並保持無污染狀態。 

• 常規污染檢查： 對污染進行例行檢查，例如目視檢查， 支原體檢測，並定期篩檢其他污染物。 

• 有限且明智地使用抗生素： 運用 抗生素 僅在必要時且持續時間有限。使用時，抗生素應成為更廣泛的污染控制策略的一部分，而不是唯一的預防措施。

透過整合這些實踐，研究人員可以保持健康、未受污染的細胞培養物並獲得可靠的實驗結果。有效的污染預防需要採取積極主動和多方面的方法，而不是過度依賴抗生素。

迷思四：你可以無限期培養細胞 

現實： 細胞培養中常見的誤解是認為細胞可以無限期培養，而不會發生任何變化或限制。雖然有些細胞係可以長時間繁殖，但由於生物學限制，大多數原代細胞和許多細胞系的壽命有限。了解這些限制對於有效的細胞培養實踐和可靠的實驗結果至關重要。

1. 複製老化： 複製老化是指細胞在分裂一定次數後喪失分裂和生長能力的過程。這種現象主要在原代細胞中觀察到，原代細胞直接源自組織且尚未永生化。當原代細胞經歷連續幾輪分裂時，它們會累積分子損傷和端粒變化，導致老化。 

2. 海弗利克極限： 海弗利克極限的概念由 Leonard Hayflick 在 1960 世紀 40 年代發現，描述了正常體細胞在進入衰老之前可以經歷的有限數量的細胞分裂。對於大多數人類原代細胞來說，這個極限大約是 60 到 XNUMX 次群體倍增。一旦細胞達到這個極限，它們就會停止分裂，表現出形態變化，並且經常進入生長停滯狀態。 

3. 端粒縮短： 驅動複製老化的關鍵機制之一是端粒縮短。端粒是染色體末端的重複 DNA 序列，可保護染色體免於降解。隨著每次細胞分裂，端粒逐漸縮短。當端粒變得非常短時，細胞就無法再分裂，從而引發衰老。這個過程就像一個生理時鐘，限制了細胞的複製潛力。 

4. 永生化細胞株： 一些細胞系經過基因改造或自然獲得的突變，使它們能夠繞過海弗利克極限並無限期複製。這些永生化細胞系，例如 HeLa 細胞，可以在培養物中連續分裂。然而，即使是永生化細胞係也會隨著時間的推移而發生遺傳和表型變化，這可能會影響它們的行為和實驗結果。 

5. 對實驗結果的影響： 原代細胞的有限壽命和延長培養期內細胞系的潛在變化可能會影響實驗結果。例如，接近老化的原代細胞可能表現出基因表現、代謝活性和對治療的反應性的改變。同樣，永生化細胞系的長期培養可能導致遺傳漂變和細胞特徵的改變。 

6. 細胞培養的最佳實踐： 

• 監控頻道編號： 追蹤細胞的傳代數量，以避免使用太接近老化的細胞。對於原代細胞，建議使用有限傳代次數的細胞，以確保結果可靠。 

• 避免過度融合： 將細胞培養到非常高的密度或讓它們過度匯合會加速老化的發生。以最佳密度定期傳代細胞有助於維持其健康和功能。 

• 遺傳和表型特徵： 定期評估細胞系的遺傳和表型特徵，以檢測隨時間推移可能發生的任何變化。這有助於確保所使用的細胞保持其原始狀態的代表性。 

• 使用新鮮批次的細胞： 對於關鍵實驗，請考慮使用新鮮批次的原代細胞或早期傳代細胞系，以盡量減少老化相關偽影的風險。 

7. 冷凍保存： 為了擴展原代細胞的效用並保持細胞系的完整性，冷凍保存是一項有價值的技術。在早期傳代數量上冷凍細胞可以讓研究人員建立一個可以根據需要解凍和使用的細胞儲備，從而減少複製老化的影響。

• 關鍵注意事項：
  • 投資於 優質低溫容器 小瓶.
  • 在冷凍前對細胞進行最佳準備。
  • 使用適當的冷凍保護劑，如 DMSO 或 專業冷凍介質 對於某些細胞類型。
  • 遵循受控冷凍方案。
  • 定期監測和維護冷凍細胞庫存。

8. 了解細胞壽命： 研究人員應該了解他們正在研究的特定細胞類型的典型壽命和特徵。這些知識有助於規劃實驗、解釋結果並確保可重複性。

透過揭穿細胞可以無限培養的神話，並強調理解複製衰老和海弗利克極限的重要性，研究人員可以更好地管理他們的細胞培養物，並獲得更準確和可重複的實驗結果。認識到細胞培養壽命的限制對於維持科學研究的完整性和可靠性至關重要。

迷思 5：FBS 批次差異不會影響細胞培養

現實： 細胞培養中常見的誤解是胎牛血清 (FBS) 批次變異性不會顯著影響細胞培養結果。這種信念可能導致研究人員忽略批次測試和一致性的重要性。然而，現實情況是不同批次胎牛血清之間的差異會對細胞培養條件和實驗重現性產生深遠影響。

1. FBS 固有的變異性： 胎牛血清是生長因子、荷爾蒙、蛋白質、維生素和其他營養素的複雜混合物。由於來源動物、採集方法、加工技術和儲存條件的差異，其成分在批次之間可能存在很大差異。這些變化會影響細胞生長、形態和行為。 

2. 對細胞生長和形態的影響： 不同批次的胎牛血清可以促進不同的細胞增殖速率並影響細胞形態。例如，一批胎牛血清可能支持具有健康形態的快速細胞生長，而另一批可能導致生長緩慢或細胞形狀異常。這種可變性可能導致實驗結果不一致並使數據解釋變得複雜。 

3. 對細胞功能和反應的影響： 胎牛血清成分的變異會改變細胞功能，例如基因表現、蛋白質合成和代謝活動。使用不同批次胎牛血清培養的細胞可能會對實驗處理產生不同的反應，因此很難得出可靠的結論。這在涉及藥物測試、基因編輯或訊號傳導途徑的研究中尤其重要。 

4. 一致性和再現性： 一致性是可靠科學研究的基石。使用可變批次的胎牛血清可能會在實驗中引入不受控制的變量，從而降低結果的再現性。如果不考慮胎牛血清批次變異性，研究人員可能會發現很難重複研究結果或比較不同研究的數據。 

5. 透過批次測試進行品質控制： 為了減輕胎牛血清批次變異的影響，必須進行徹底的批次測試。批次測試涉及使用特定細胞系評估不同批次的胎牛血清，以確定它們對細胞生長、活力、形態和其他相關參數的影響。透過選擇最合適的批次，研究人員可以確保更一致和可靠的細胞培養條件。 

6. 建立批次一致性： 一旦確定了合適的 FBS 批次，購買較大數量的該批次有利於確保實驗的一致性。保持同一批次胎牛血清的一致供應有助於最大限度地減少變異性並支持可重複的研究結果。 

7. 文件和記錄保存： 保存胎牛血清批號及其在特定細胞系中的性能的詳細記錄至關重要。文件使研究人員能夠追蹤哪些實驗使用了哪些批次，有助於更好地理解和解釋結果。 

8. 供應商溝通： 與胎牛血清供應商建立良好的溝通也是有利的。供應商可以提供詳細的批次規格，並可以根據研究的需要提供選擇適當批次的指導。

優化 FBS 使用： 

• 批次測試協議： 實施批量測試協議作為實驗室標準操作程序的一部分。這包括建立初步實驗，將新的胎牛血清批次與先前測試和批准的批次進行比較。 

• 性能指標： 定義用於評估胎牛血清批次的具體性能指標，例如細胞增殖率、形態和對治療的反應。 

• 過渡策略： 當過渡到新的 FBS 批次時，透過在幾次傳代中以遞增的比例混合新舊批次，逐漸使細胞培養物適應新批次。

透過強調胎牛血清批次測試和一致性的重要性，研究人員可以提高細胞培養實驗的可靠性和可重複性。解決胎牛血清批次變異性是實現準確、可靠的科學結果的關鍵一步。

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迷思 6：FBS 濃度越高，細胞生長越好

現實： 一般認為，增加細胞培養基中胎牛血清的濃度總是會促進更好的細胞生長。雖然胎牛血清提供支持細胞增殖的必需生長因子、荷爾蒙和營養物質，但過量的胎牛血清可能會導致一些意想不到的後果，對細胞培養和實驗結果產生負面影響。

不需要的差異化： 高濃度的胎牛血清會誘導某些細胞類型發生不必要的分化。例如，暴露於過量胎牛血清的幹細胞或祖細胞可能開始過早分化為特定譜系，從而使旨在維持其未分化狀態或以受控方式指導其分化途徑的研究變得複雜。 

2. 改變細胞反應： 過量的胎牛血清會改變細胞反應，導致細胞訊號路徑、基因表現譜和代謝活動發生變化。這些改變可能會掩蓋實驗治療的效果，並使結果難以準確解釋。在高 FBS 濃度下培養的細胞可能表現出不反映其自然生理狀態的行為。 

3. 實驗效果的掩蓋： 高水平的胎牛血清可以掩蓋實驗治療的效果。胎牛血清中存在豐富的生長因子和激素，可能會掩蓋添加的實驗化合物或條件的影響，很難區分對治療的特定反應。這種掩蔽效應可能導致錯誤的結論並降低實驗的可重複性。 

4. 增加可變性： 不同批次的胎牛血清成分可能有顯著差異，導致細胞培養實驗的變異性增加。使用高濃度的胎牛血清會加劇這個問題，因為細胞變得更加依賴特定的批次特徵。這種可變性會使數據解釋變得複雜並阻礙再現性。 

5. 成本考慮： FBS 是一種昂貴的試劑，使用較高濃度會增加細胞培養的成本。這可能會導致實驗室預算緊張，特別是對於大規模實驗或長期研究。將胎牛血清濃度優化至最低有效水平可以幫助管理成本而不影響細胞生長。 
6. 道德與供應問題： 胎牛血清的生產涉及使用牛胎兒，引發了倫理問題和與動物福利相關的問題。此外，由於監管變化和供應鏈中斷等多種因素，胎牛血清供應可能不一致。減少胎牛血清的使用與開發更永續和道德上負責任的細胞培養實踐的努力相一致。  

優化 FBS 使用： 研究人員不應假設胎牛血清越多越好，而應針對其特定細胞類型和實驗目標優化胎牛血清濃度。這涉及： 

• 滴定實驗： 進行滴定實驗以確定支持最佳細胞生長和功能所需的最低胎牛血清濃度。 

• 批量測試： 測試不同批次的胎牛血清，以確定針對給定細胞系或實驗最一致、最有效的批次。 

• 無血清替代品： 探索無血清或低血清培養系統，它可以提供更明確和受控的條件，減少變異性和倫理問題。 

• 定義的補充： 使用可提供特定功能的特定補充劑 生長因子和營養素 根據細胞類型量身定制，最大限度地減少對胎牛血清的依賴。

透過仔細優化胎牛血清濃度並考慮替代方案，研究人員可以提高細胞培養實驗的可靠性和重現性，同時解決成本和道德問題。

Biowest 的 FBS：對品質和可追溯性的承諾

Biowest的FBS以其高品質和高品質在細胞培養試劑領域中脫穎而出。 嚴格的可追溯性。 Biowest 確保其胎牛血清經過精心採購和加工，為研究人員提供符合嚴格的純度和一致性標準的產品。

可追溯性和文檔： 

• 原產地證明書（COO）： Biowest 提供原產地證書，確保胎牛血清來自可靠且道德管理的牛群。該文件向使用者保證血清的地理來源。 

• 分析證書 (COA)： 每批胎牛血清均附有分析證書，詳細說明了具體的生化特性和進行的品質控制測試。這種透明度使研究人員能夠驗證血清是否適合其特定應用。 

• 獸醫健康證明： 每批胎牛血清均附有獸醫健康證書，證明血清來源的動物健康且沒有傳染性疾病。這保證了產品的生物安全性。

減少批次之間的差異： Biowest 致力於最大限度地減少批次之間的差異，這對於保持一致的實驗條件至關重要。他們透過以下方式實現這一目標： 

• 標準化生產流程： 在血清的採集和處理過程中遵守嚴格的方案和品質控制措施。 

• 批量測試： 對每批次進行全面測試，以確保生長因子含量、內毒素水平和蛋白質濃度等關鍵參數的一致性。

亞特蘭提斯生物科學批量預訂： 在 Atlantis Bioscience，我們提供有價值的服務來協助研究人員管理他們的胎牛血清供應。借助 Atlantis Bioscience，使用者可以獲得特定批次的 FBS，以確保實驗的一致性。這對於一致性至關重要的長期研究特別有益。

• 客製訂單： 客製化批次預訂以滿足您研究專案的特定需求，確保您始終能夠獲得相同的高品質血清。

透過選擇 Biowest 的 FBS 和 Atlantis Bioscience，研究人員可以在全面的文檔和對品質的承諾的支持下提高細胞培養實驗的可靠性和重現性。

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