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NucView® 488 Caspase-3 底物是一種新型細胞膜滲透性螢光 caspase 底物,設計用於即時檢測活細胞內的 caspase-3 活性。訪問我們的 產品影片頁面 觀看 NucView® 488 的實際操作影片。
即使在同一群體內,細胞凋亡率通常也因細胞而異。結果,各種細胞凋亡事件或伴隨細胞凋亡過程的標記物在細胞之間也不同地發生。因此,能夠在單一細胞的基礎上檢測這些凋亡事件非常重要。傳統上,半胱天冬酶活性可以使用膜不可滲透的螢光酶底物(例如 DEVD-R110)或螢光標記的抑制劑(例如 FLICA 試劑)來檢測。在前一種情況下,需要細胞裂解,因此無法檢測活細胞中的 caspase 活性。此外,此類半胱天冬酶測定僅測量高度異質細胞群在給定時間的平均半胱天冬酶活性。對於後一種情況,雖然FLICA試劑可以進入活細胞檢測caspase活性,但只有使用該試劑後的初始螢光信號才能真實反映酶活性或凋亡細胞的狀態,因為在初始“ “快照”需要考慮抑製劑對酵素和凋亡細胞本身的潛在幹擾。
與傳統的 caspase 測定不同,NucView® 488 Caspase-3 底物可檢測單一完整細胞內的 caspase-3 活性,而不會抑制 caspase-3 活性。此底物由螢光 DNA 染料和 caspase-3 特異性的 DEVD 底物部分組成。此底物作為 DNA 染料既無螢光又無功能,可快速穿過細胞膜進入細胞質,在細胞質中被 caspase-3 裂解,形成高親和力 DNA 染料,將細胞核染成亮綠色。因此,NucView® 488 caspase-3 底物具有雙功能,可檢測細胞內 caspase-3 活性並可視化細胞凋亡過程中核形態的變化。 caspase-3 活性產生的螢光染色與隨後的免疫染色固定和透化相容。
此試劑盒含有 NucView® 488 Caspase-3 底物和 caspase-3 抑制劑 Ac-DEVD-CHO,足以進行 100 次流式細胞儀或微孔板測定(200 uL 測定體積)。試用裝試劑盒包含足夠 25 次測定的試劑(200 uL 測定體積)。使用此試劑盒可以進行的螢光顯微鏡檢測的數量可能會根據培養容器的大小和所使用的染色體積而有所不同。該試劑盒提供了一種方便的工具,可使用螢光顯微鏡或流式細胞儀根據 caspase-3 活性分析凋亡細胞群。
套件組件:
- NucView® 488 Caspase-3 底物,0.2 mM,溶於 DMSO
- Caspase-3 抑制劑 Ac-DEVD-CHO,2 mM DMSO 溶液
功能:
- 完整細胞中的即時 caspase-3 檢測: 檢測群體中單一細胞內的 caspase-3 活性。
- 雙功能: 允許同時觀察 caspase-3 活性和凋亡核形態。
- 簡單快速: 15 分鐘均質測定,無需洗滌。
- 多才多藝: 用於使用螢光素檢測設定透過流式細胞儀、螢光顯微鏡或螢光酶標儀進行檢測。
- 可修復: 與後續免疫螢光染色的標準固定和透化方法相容。
我們也提供 DMSO 中 488 mM 的 NucView® 3 Caspase-1 底物(10402) 或 PBS 中的 1 mM (10403),適合希望控制檢測中 DMSO 濃度的客戶。請注意,在對 DMSO 不敏感的細胞類型中,底物孵育過程中 DMSO 的存在可以增強訊號。查看我們的完整選擇 NucView® 基板和套件.
NucView® 酵素底物技術受美國專利保護。

