GloMelt™ 熱轉變蛋白質穩定性試劑盒

GloMelt™ 熱轉變蛋白質穩定性試劑盒

用於在熱位移測定中基於螢光測量蛋白質解折疊或熱穩定性的試劑盒,也稱為 Protein Thermal Shift™、差示掃描螢光測定法或 Thermoflu 測定。

GloMelt™ 熱轉變蛋白質穩定性試劑盒

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Biotium 產品僅在新加坡和泰國銷售。

產品描述

GloMelt™ 熱位移蛋白質穩定性試劑盒用於透過執行熱位移測定(也稱為蛋白質熱位移™、差示掃描螢光測定法或 Thermoflor 測定)來檢測蛋白質解折疊或測量熱穩定性。

功能

  • 綠色螢光最適合 qPCR 儀器和 ROX 標準化
  • 與高濃度洗滌劑相容
  • 耐受較寬的 pH 範圍、還原劑和常見緩衝劑/賦形劑
  • 非常適合高通量測定、低反應體積和低蛋白質濃度
  • 在水性緩衝液中高度溶解且穩定

套件組件

  • GloMelt™ 染料,200X
  • 山羊 IgG 對照,10 mg/mL
  • ROX 參考染料,40 uM(僅限 33022-T/33022-1)

光譜特性

  • GloMelt™ 染料 Ex/Em 468/507 nm
  • ROX 參考染料 Ex/Em 575/600 nm

關於 GloMelt™ 熱轉變蛋白質穩定性試劑盒

環境敏感的螢光染料可用於監測蛋白質的溫度依賴性解折疊。蛋白質的熔解溫度 (Tm) 反映了蛋白質的熱穩定性。

GloMelt™ 染料在與變性蛋白質的疏水區域結合後會發生螢光增強,因此可用於透過執行熱位移測定(也稱為蛋白質熱位移™、差示掃描螢光測定法或Thermoflu 測定)來檢測蛋白質解折疊或測量熱穩定性。

熱位移測定是一種快速且廉價的技術,可量化蛋白質變性溫度的變化,因此可用於篩選影響蛋白質熱穩定性的條件,例如蛋白質突變、配體結合和緩衝液配方(例如pH、鹽、去垢劑) ,和其他添加物)。這些測定快速(通常約 30 分鐘)並在定量 PCR 系統上進行。熱位移方法與高通量篩選相容,並且比圓二色性和差示掃描量熱法等方法所需的蛋白質少得多。

要了解有關 GoMelt™ 的更多資訊並了解其與競爭對手產品的比較,請造訪我們的 GoMelt™ 技術頁面.

 

熱位移測定的可能用途

  • 優化蛋白質穩定性和儲存的緩衝液配方
  • 確定突變如何影響蛋白質的穩定性
  • 快速篩選小分子候選藥物和其他蛋白質結合配體
溴結構域蛋白的小分子抑制劑已在癌症模型中顯示出治療效果。在此,在存在溴結構域抑制劑 JQ10 或 RVX-2 的情況下,對 1 ug 溴結構域 BRD208 進行了 GloMelt™ 熱位移測定。如熔解曲線的移動所示,抑制劑結合穩定了蛋白質。

GloMelt™ 染料與競爭對手的比較

  • GloMelt™ 染料與其他對環境敏感的染料(如 SYPRO® Orange 和 PROTEOSTAT® TS 染料)相比具有顯著優勢。
  • GloMelt™ 染料產生強烈訊號,因為它針對 qPCR 儀器的 SYBR® Green 通道檢測進行了優化,因此可以使用較低的反應體積和較低的蛋白質濃度。
  • GloMelt™ 染料可與高濃度的蛋白質穩定劑(如甘油和山梨醇)以及蛋白質去穩定劑(如 DTT 和咪唑)相容。
  • 與 SYPRO® Orange 不同,GloMelt™ 染料在高洗滌劑濃度下表現非常出色。
  • 在熱位移分析過程中,ROX 染料可以與 GloMelt™ 染料一起使用,這可透過增加需要 ROX 被動參考染料的 PCR 儀器中的重複一致性來改善結果。
SYBR 是 Thermo Fisher Scientific 的註冊商標。 Proteostat 是 Enzo Life Sciences 的註冊商標。

參考

埃萊夫 (2019) 8, e47172 doi:10.7554/eLife.47172

產品屬性

激發/發射 468/507 納米

協議