產品描述
Exo-spin™ 技術結合了沉澱和尺寸排除層析 (SEC),使其優於僅依賴一種方法的其他技術。僅使用沉澱物進行外泌體分離將導致大量非外泌體蛋白質和其他材料的共純化以及沉澱劑的殘留。 SEC 對於外泌體分離是可靠的,但在 SEC 分離之前需要沉澱步驟來濃縮樣品。如果沒有沉澱,將觀察到較低的外泌體回收率。我們提供簡單的兩步驟實驗方案,讓您可以在 2 小時內純化樣品,並獲得一致且可靠的結果!
然而,EX04 Exo-spin™ 套件僅包含已填充和平衡的即用型 SEC 色譜柱,因為某些應用(例如質譜)可能不建議沉澱步驟,或者 1 ml 血液樣本不需要沉澱步驟。
EX04 Exo-spin™ 試劑盒可處理多達 500 ml 的細胞培養基、唾液、尿液和 1 ml 的血液樣本(血漿和血清)。
推薦碼 | 產品描述 |
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EX04-5 | Exo-spin™,5 個 midi 柱 |
EX04-20 | Exo-spin™,20 個 midi 柱 |
EX06-30 | Exo-spin™ 緩衝液,30 毫升 |
EX06-250 | Exo-spin™ 緩衝液,250 毫升 |
* 對於腦脊髓液 (CSF) 和母乳樣本,經過驗證的方案僅適用於 EX01。使用者指南中提供了這些協定。
什麼是尺寸排阻層析 (SEC)?
SEC 是一種根據溶液中顆粒的大小來分離顆粒的方法。色譜柱填充穩定的聚合物珠,形成多孔基質。當含有外泌體的溶液添加到SEC柱中時,較小的顆粒將被捕獲在孔中,而較大的分子不會進入孔並首先洗脫。因此,不同的洗脫級分將含有不同大小的分子;首先是大顆粒,然後是較小的顆粒。
該技術非常適合獲得高度純化的樣品,其中外泌體與其他非 EV 成分分離,並且它與低和高初始樣品體積相容。
Exo-spin™ 色譜管柱和樹脂孔徑
柱床體積為 10 ml,允許將 1 ml 體積加載到柱頂部。
樹脂的孔徑約為 30 nm,以獲得高純度的外泌體洗脫。所有其他小於 30 nm 的分子(例如蛋白質、脂質)將進入孔中並保留在色譜柱中。
最高的回收率和純度
如上所述,基本上所有蛋白質和脂質都將保留在色譜柱中,並晚於外泌體洗脫,確保為下游應用準備高純度的樣品。
我們所有的色譜柱均在我們的實驗室製造,以確保每批之間的高重現性。作為再現性和批次間一致性的證明,已經發表了大量經過同行評審的科學論文,描述了 Exo-spin™ 的使用。
收到後,將純化管柱和 Exo-spin™ 緩衝液儲存在 4°C 下。所有其他組件應在室溫 (15°C – 25°C) 下儲存。
如有任何其他問題,請參閱下面的常見問題解答文件。
我們設計了理想的入門包來指導您的外泌體研究。入門包包括您選擇的外泌體純化試劑盒、外泌體驗證的抗體和 NTA 分析。完整的詳細資訊可以在此處的產品頁面中找到。
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[手風琴標題=“產品數據”]
EX04 Exo-spin™ midi 管柱比較數據
10 ml 條件細胞培養基中總外泌體回收率的比較。使用 Exo-spin™ 緩衝液 + Exo-spin™ midi 管柱所獲得的總顆粒產量大於使用膜親和法所獲得的產量。值得注意的是,在 Exo-spin™ midi 柱外泌體分離之前使用時,Exo-spin™ 緩衝液比通用 PEG 6000 更有效。
數據由奈米顆粒追蹤分析 (NTA) 確定。每條曲線代表每個外泌體分離方法三次重複實驗的 3 次技術重複測量的平均值。 (PM = 沉澱法)。圖表取自並改編自(Martins, TS et al., 2018)。
使用奈米粒子追蹤分析 (NTA) 來表徵 Exo-spin™ 分離的外泌體
使用 NTA 表徵外泌體。使用 Exo-spin™ 試劑盒分離外泌體,並使用 ZetaView® 儀器進行分析。
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[手風琴標題=“下游應用”]
EX04 Exo-spin™ 套件與所有下游應用相容,並已在多種不同應用中發布。
RNA分析:
- Santangelo L、Giurato G、Cicchini C、Montaldo C、Mancone C、Tarallo R、Battistelli C、Alonzi T、Weisz A 和 Tripodi M. (2016)。 RNA 結合蛋白 SYNCRIP 是控制 MicroRNA 分選的肝臟細胞外泌體機制的組成部分。 報告細胞 17(3):799-808。
- Brook AC、Jenkins RH、Clayton A、Kift-Morgan A、Baby AC、Shephard AP、Mariotti B、Cuff SM、Bazzoni F、Bowen T、Fraser DJ 與 Eberl M. (2019)。嗜中性球來源的 miR-223 作為細菌性腹膜炎的局部生物標記。 科學報告 9(1):10136。
免疫測定:
- Salimu J、Webber J、Gurney M、Al-Taei S、Clayton A 和 Tabi Z. (2017)。前列腺癌衍生的外泌體對樹突狀細胞功能的顯著免疫抑制。 細胞外囊泡雜誌 6(1):1368823。
蛋白質測定:
- Welton JL、Webber JP、Botos LA、Jones M 與 Clayton A. (2015)。用於從血漿中分離細胞外囊泡的現成層析管。 細胞外囊泡雜誌 4:27269。
應用說明:
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[手風琴標題=“使用者指南”] EX04_Exo-spin_使用者指南[/手風琴]
[手風琴標題=”常見問題”] 常見問題[/手風琴]
[手風琴標題=“MSDS/技術表”] EX03_和_EX04_MSDSDS.pdf[/手風琴]
[手風琴標題=“產品手冊”] CellGS 外泌體手冊.pdf[/手風琴]
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