Kohjin Bio KBM581 1L(用於T細胞擴增的無血清培養基)

Kohjin Bio KBM581 1L(用於T細胞擴增的無血清培養基)

Kohjin Bio KBM581 1L(用於T細胞擴增的無血清培養基)

KBM 581 在日本最常用於過繼性免疫療法。它不含注射級重組人類胰島素血清白蛋白以外的蛋白質。

KBM 581 - 用於T細胞擴增的無血清培養基

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KBM 581 – 用於T細胞擴增的無血清培養基

專為T細胞擴增及過繼性免疫療法設計

KBM 581 是一種高品質、無血清培養基,針對 人類T細胞的活化與擴增,包括 細胞激素誘導的殺傷(CIK)細胞,來自周邊血單核細胞(PBMCs)。部分 廣泛採用的 KBM 500 系列在日本,KBM 581 常用於臨床研究 過繼免疫治療 現在可以透過 亞特蘭提斯生物科學公司 用於轉化研究。

T細胞療法開發的關鍵優勢

  • 採用高純度、GMP級試劑及原料製備。
  • 除注射級人血清白蛋白及重組人胰島素外,不含蛋白質的配方。
  • 增強的緩衝能力可確保在整個延長的培養過程中保持穩定的 pH 值。
  • 即使含有 L-麩醯胺酸,也能保持較長的保存期限。
  • 含有硫酸卡那黴素作為抗菌劑。
  • 在通過 ISO 9001 和 ISO 13485 認證的工廠生產。

 

應用領域

  • PBMC衍生T細胞的擴增
  • 用於臨床前和轉化研究的CIK細胞生成
  • 無飼養層及低血清細胞治療製程開發
  • 在燒瓶或封閉的培養袋中進行放大培養

 

細胞培養範例

  1. 將 IFN-γ 加入 KBM 581 中,使最終濃度為 1,000 IU/mL。
  2. 將人類自體血清添加到上述製備的培養基中,至最終濃度為 10%。
  3. 計數分離或解凍的單核細胞數量,以 0.52 × 10⁶ 細胞/mL 的濃度接種這些細胞,並在 37 °C 和 5% CO₂ 下孵育。
  4. 在第 1 天,在上述製備的培養基中加入 IFN-γ(最終濃度為 300 IU/mL)和抗 CD3 抗體(最終濃度為 50 ng/mL)。
  5. 從第4天到細胞恢復期,每隔一段時間,根據細胞生長情況,向新培養基中添加IFN-γ(如有必要,可使用T型燒瓶和透氣培養袋擴大培養規模)。加入新鮮培養基稀釋上述細胞懸浮液,使細胞濃度達到12 × 10⁶細胞/mL。依目標細胞數量,培養14至21天。

參考: 2002 布萊克韋爾科學有限公司 英國血液學雜誌 116:78-86

參考出版物

李Y.、謝S.、陳明、李紅、王Y.、範Y.、安K.、吳Y.、肖W.
在 Komagataella phaffii 中開發具有自然殺手細胞刺激活性的抗體-配體融合蛋白 scFvCD16A-sc4-1BBL。
微生物細胞工廠22(1)。 (2023)。

文章片段: 「將純化的 PBMC 以 1.5×106 個細胞/mL 的密度接種到塗有 scFvCD430,168A-sc16-4BBL(1 μg/ml,2 °C 24 小時)的 fask(康寧,4)中,並在 KBM-581培養基 (Corning, 88–51-CM) 含有 5% 熱滅活自體血漿和 1000 IU/mL rhIL-2 (金絲利,江蘇,中國),在 13% CO5 和 2℃ 下培養 37 天,每 2– 3天即可將細胞密度維持在1.3至3.2×106細胞/mL之間。

 

李Y.,謝S.,陳M. 等。

抗體-配體融合蛋白 scFvCD16A 的開發 - sc4-1BBL 中 法氏小球藻 對自然殺手細胞具有刺激活性。

微生物細胞事實 22,67(2023)。

作者: https://doi.org/10.1186/s12934-023-02082-6

文章片段: 「純化的 PBMC,密度為 1.5 × 106 個細胞/mL,接種於塗有 scFvCD430,168A-sc16-4BBL(1 μg/ml,2°C 24 小時)的燒瓶(Corning,4)中,並在 KBM-581培養基 (Corning,88–51-CM)含有 5% 熱滅活自體血漿和 1000 IU/mL rhIL-2(中國江蘇金絲利),在 13% CO 下培養 5 天2 37℃,每2~3天添加新鮮培養基,維持細胞密度在1.3~3.2×10之間6 細胞/mL。

 

曹G.、張G.、劉明、劉J.、王Q.、朱L.、萬X. (2022)。
在體外試驗中,分泌 B3H7 靶向 BiTE 的 GPC3 靶向 CAR-T 細胞對肝細胞癌細胞表現出有效的細胞毒性活性。
生物化學和生物物理學報告31101324。

文章片段:然後用含有不同 CAR 構建體的慢病毒上清液轉導活化的 T 細胞。 8微克/毫升 聚凝胺 (Beyotime) 用於轉導 GPC3-BiTE CAR-T 細胞。慢病毒轉染細胞後2天,新鮮 介質(KBM581介質) 被用作替代品。

 

林K.,夏B.,王X. 等。

肝細胞癌奈米抗體的開發及基於奈米抗體的CAR-T技術的應用。

醫學雜誌 22,349(2024)。

作者: https://doi.org/10.1186/s12967-024-05159-x

文章片段:使用陰性選擇磁珠(BD Biosciences)純化 T 細胞並在 KBM581 培養基

 

鄭Y.,賴Z.,王B. 等。

經 Gpc3 適體修飾的自然殺手細胞可增強肝細胞癌的過繼性免疫療法。

迪斯可翁 14,164(2023)。

作者: https://doi.org/10.1007/s12672-023-00780-6

文章片段:淋巴球無血清培養基(KBM581培養基)購自康寧公司(貨號:88-581-CM,美國紐約)。

 

曾Y.、張W.、李Z.、鄭Y.、王Y.、陳G.、邱L.、柯K.、蘇X.、蔡Z.、劉,J.,&劉,X.
基於新抗原的個人化晚期集尿管癌免疫治療:病例報告。
癌症免疫治療雜誌8(1),e000217。 (2020)。

文章片段:然後用培養基(1%自體血清+KBM581+1000 U/mL rhGM-CSF(重組人類粒細胞-巨噬細胞集落刺激因子)+500 U/mL白細胞介素(IL)-4)48小時,然後加載13種新抗原勝肽(25 µg/勝肽),並附有培養基中加入某些細胞激素(腫瘤壞死因子 α,1000 U/mL;IL-1b,10 ng/mL;IL-6,1000 U/mL)以誘導 DC 過夜成熟。

 

週Z.、李J.、洪J.、陳S.、陳M.、王L.、林W.、葉Y.。
使用胃癌斑馬魚異種移植模型,Interleukin-15 和趨化因子配體 19 增強嵌合抗原受體 T 細胞的細胞毒性作用。
免疫學前沿13。 (2022)。

文章片段:PBMC 在無血清 T 淋巴細胞中孵育 KBM581 培養基 (康寧公司;紐約,美國),然後以 6 x 2 的密度接種到 10 孔板(康寧公司)上6 細胞/mL。

 

高Y.、郭J.、包X.、熊F.、馬Y.、譚B.、餘L.、趙Y.、陸J.
自體不變自然殺手 T 細胞的過繼轉移作為晚期肝細胞癌的免疫療法:一項 ​​I 期臨床試驗。
腫瘤科醫師26(11),e1919–e1930。 (2021)。

文章片段:將 PBMC 重懸於康寧無血清細胞培養基中 KBM581 (康寧公司,康寧,紐約)並用 100 ng/mL α-GalCer(BioVision,米爾皮塔斯,加利福尼亞州)和 100 U/mL 非動物重組人類白細胞介素 2 刺激…”

 

陳明、劉X、彭娜 等。

CD19靶向雙抗體和增強雙抗體的建構及其治療B細胞惡性腫瘤的功效。

Exp Hematol Oncol 12,64(2023)。

作者: https://doi.org/10.1186/s40164-023-00423-0

文章片段:從 B-ALL 患者分離出患者來源的 T 細胞,並在淋巴球培養基中培養 KBM581 (康寧,美國)補充 10% FBS 和 50 IU/mL 人類白細胞介素 2 (IL-2)(R&D Systems,美國)。

 

喬Y.,陳J.,王X.,嚴S.,譚J.,夏B.,陳Y.,林K.,鄒F.,劉B.,何X.、張Y.、張X .、張H.、吳X.、盧L.
透過同時敲低六種抑制性膜蛋白來增強 CAR-T 細胞對抗膽管癌的活性。
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文章片段:轉導的 T 細胞在 KBM581 中等 補充 1% 青黴素-鏈黴素、2 mmol/L GlutaMAX (GIBCO)、0.1 mmol/L 非必需胺基酸 (GIBCO),37°C,5% CO2

論文規範

屬性 信息
產品描述* KBM 581
貓。 沒有。 16025810
形成 液體
體積 1,000 mL
儲藏條件 2–8 攝氏度
保質期 自生產日起 8 個月
製造國 Japan
生產廠家 KohJin 履歷