GloMelt™ 热迁移蛋白稳定性试剂盒

GloMelt™ 热迁移蛋白稳定性试剂盒

试剂盒,用于在热位移分析(也称为蛋白质热位移™、差示扫描荧光法或 Thermofluor 分析)中基于荧光测量蛋白质去折叠或热稳定性。

GloMelt™ 热迁移蛋白稳定性试剂盒

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Biotium 产品仅在新加坡和泰国销售。

产品介绍

GloMelt™ Thermal Shift Protein Stability Kit 用于检测蛋白质去折叠或通过执行热迁移测定来测量热稳定性,也称为 Protein Thermal Shift™、差示扫描荧光法或 Thermofluor 测定。

功能

  • 最适合 qPCR 仪器和 ROX 标准化的绿色荧光
  • 与高浓度洗涤剂兼容
  • 耐受较宽的 pH 范围、还原剂和常见的缓冲液/赋形剂
  • 非常适合高通量检测、低反应量和低蛋白质浓度
  • 在水性缓冲液中高度溶解和稳定

套件组件

  • GloMelt™ 染料,200X
  • 山羊 IgG 对照,10 mg/mL
  • ROX 参考染料,40 uM(仅限 33022-T/33022-1)

光谱属性

  • GloMelt™ 染料 Ex/Em 468/507 nm
  • ROX 参考染料 Ex/Em 575/600 nm

关于 GloMelt™ 热迁移蛋白稳定性试剂盒

环境敏感的荧光染料可用于监测蛋白质的温度依赖性展开。 蛋白质的解链温度 (Tm) 是蛋白质热稳定性的指标。

GloMelt™ 染料在与变性蛋白质的疏水区域结合后会发生荧光增强,因此可用于检测蛋白质去折叠或通过执行热位移分析(也称为蛋白质热位移™、差示扫描荧光法或 Thermofluor 分析)测量热稳定性。

热位移测定是一种快速且廉价的技术,可量化蛋白质变性温度的变化,因此可用于筛选影响蛋白质热稳定性的条件,例如蛋白质突变、配体结合和缓冲剂配方(如 pH 值、盐、去垢剂)和其他添加剂)。 这些测定快速(通常约 30 分钟)并在定量 PCR 系统上进行。 热位移方法与高通量筛选兼容,并且比圆二色性和差示扫描量热法等方法需要更少的蛋白质。

要了解有关 GoMelt™ 的更多信息并查看它与竞争对手产品的比较,请访问我们的 GoMelt™ 技术页面.

 

热位移分析的可能用途

  • 优化缓冲液配方以提高蛋白质稳定性和储存
  • 确定突变如何影响蛋白质的稳定性
  • 快速筛选用于蛋白质结合的小分子候选药物和其他配体
溴结构域蛋白的小分子抑制剂已在癌症模型中显示出治疗效果。 在此,在溴结构域抑制剂 JQ10 或 RVX-2 存在的情况下,对 1 ug 溴结构域 BRD208 进行了 GloMelt™ 热迁移分析。 如熔解曲线的变化所示,抑制剂结合使蛋白质稳定。

GloMelt™ 染料与竞争对手

  • GloMelt™ 染料与其他对环境敏感的染料(如 SYPRO® Orange 和 PROTEOSTAT® TS 染料)相比具有显著优势。
  • GloMelt™ 染料会产生强信号,因为它针对 qPCR 仪器的 SYBR® Green 通道进行检测而优化,因此可以使用低反应体积和低蛋白质浓度。
  • GloMelt™ 染料与高浓度的蛋白质稳定剂(如甘油和山梨糖醇)以及蛋白质去稳定剂(如 DTT 和咪唑)兼容。
  • 与 SYPRO® Orange 不同,GloMelt™ 染料在高洗涤剂浓度下表现非常出色。
  • 在热位移分析过程中,ROX 染料可以与 GloMelt™ 染料一起使用,这可通过增加需要 ROX 被动参考染料的 PCR 仪器中的重复一致性来改善结果。
SYBR 是 Thermo Fisher Scientific 的注册商标。 Proteostat 是 Enzo Life Sciences 的注册商标。

案例

埃莱夫 (2019) 8, e47172 doi:10.7554/eLife.47172

产品属性

激发/发射 468/507纳米

操作流程概述