使用 CellGem 进行单克隆抗体生产的最简单单细胞分离方法

使用 CellGem 进行单克隆抗体生产的最简单单细胞分离方法

使用 CellGem 进行单克隆抗体生产的最简单单细胞分离方法


关键精华
  • 了解单细胞分离在创建纯 mAb 产生细胞系中的关键作用。
  • 发现极限稀释技术的缺点(效率低、耗时、资源密集)。
  • 探索 CellGem 用于单细胞捕获和后续培养的创新微流体技术。
  • 了解 CellGem 如何利用最少的试剂和传统实验室设备简化单细胞分离。pen_spark

单克隆抗体 单克隆抗体 (mAbs) 通常用于诊断和治疗癌症等多种疾病。单克隆抗体由免疫细胞产生,这些免疫细胞是特定亲本细胞的克隆。单克隆抗体是通过将 B 细胞(从免疫小鼠中分离)与永生骨髓瘤细胞系融合而产生的。融合细胞称为杂交瘤,可产生抗体。筛选杂交瘤以选择具有最理想抗体特异性的克隆。这些单个克隆的产物是单克隆抗体。

单克隆抗体生产中单细胞的分离是重要的一步。 这 有限稀释技术 是本应用中最常用的方法之一,涉及连续稀释原理。目标是将细胞悬浮液稀释到只有一个细胞被分离到单个微孔中的程度。在这种技术中,接种密度非常关键。如果使用低接种密度,这将增加空孔的数量,从而浪费时间和耗材。

相反,如果细胞接种密度较高,则一孔中出现多个细胞的几率会更高,而且不能保证获得的克隆来自单个细胞,因为显微镜下很难识别。因此,通常需要进行几次有限稀释,才能有效地产生良好的单克隆细胞系。

CellGem——一种基于微流控的新型单细胞分离技术

在这里,我们描述一个 单细胞分离的新方法. 细胞宝石,是一种一次性芯片,可以使用常规微量移液器和显微镜分离、验证和扩增单个细胞以形成单克隆细胞群落。

CellGem 是一种简单易用的微流控芯片,只需要最少的试剂消耗。该芯片由 60 个孔阵列组成,芯片一侧是细胞捕获孔,另一侧是细胞培养孔。简单地说,将细胞悬浮液加载到芯片上,具有所需大小的细胞将落入捕获孔中,而其他未捕获的细胞将被洗掉。然后翻转芯片,让捕获的单个细胞落入培养孔中。然后在这些孔中培养单个细胞以形成单细胞菌落,然后收获并转移到常规培养器皿中。由于微流控系统,单个细胞可以培养更长时间,并且存活率更高。

这种基于微流控芯片的创新单克隆细胞系分离方法成本低廉
时间有效,是限制稀释或荧光激活细胞的更好替代方法
需要专门设备的分选 (FACS)。

不同单细胞分离方法(极限稀释、FACS 和 CellGem)的比较

想要了解更多关于不同的单细胞分离技术的信息,请查看我们的相关博客“7 种单细胞分离技术=


案例

  • AtlantisBioscience。7 种单细胞分离技术。14 年 2022 月 XNUMX 日。网址: 7 种单细胞分离技术 – ATLANTIS BIOSCIENCE
  • Yeh CF、Lin CH、Chang HC、Tang CY、Lai PT、Hsu CH。用于生成单克隆细胞的微流控单细胞克隆 (SCC) 装置。Cells。2020;9(6):1482。2020 年 18 月 10.3390 日发布。doi:9061482/cellsXNUMX

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