一种基于染料的高性能 qPCR 预混液,包含 EvaGreen®、Cheetah™ HotStart Taq 聚合酶和 Forget-Me-Not™ 2 色跟踪系统。
产品介绍
2X Forget-Me-Not™ EvaGreen® qPCR Master Mix 是一种即用型高性能染料预混液,用于 qPCR 和 DNA 熔解曲线分析。 2X Master Mix 包含 EvaGreen® 染料、Cheetah™ HotStart Taq DNA 聚合酶、dNTP 和低浓度的惰性蓝色染料,使用户能够轻松区分含有反应混合物的孔和空孔。 对于 2 色跟踪,将您的模板与 Forget-Me-Not™ 模板缓冲液混合,以一目了然地查看哪些孔具有预混液或模板。
- 即用型,只需添加引物和 DNA 模板
- Superior EvaGreen® Dye 比 SYBR® Green I 更敏感,并且与 HRM® 兼容
- 使用 Forget-Me-Not™ 2 色跟踪防止样品浪费和代价高昂的错误
- 采用 Cheetah™ HotStart Taq 配制,用于快速循环协议
- 直接观察凝胶中的扩增产物荧光
- 没有 ROX 或单独的 ROX 可与任何 PCR 仪器一起使用
防止浪费和捕捉错误
发现移液错误,避免浪费时间、试剂和珍贵的 DNA 样本。 2 色追踪 Forget-Me-Not™ EvaGreen® qPCR 预混液具有独特的组合,即含有低浓度蓝色染料的预混液和含有高浓度蓝色染料的 DNA 模板缓冲液。 当您将 2X Forget-Me-Not™ Master Mix 添加到您的反应中时,它会显示为淡蓝色(图 1,左)。 然后,当您将包含 Forget-Me-Not™ 模板缓冲液的模板添加到反应中时,颜色会变为深蓝色(图 1,右)。 如果您不需要 2 色跟踪,则 Forget-Me-Not™ 模板缓冲区是可选的。 你也可以使用 Forget-Me-Not™ EvaGreen® qPCR Master Mix(低 ROX 或高 ROX),它们与 ROX 预混并允许单色跟踪。
安心加上 PCR 性能
Forget-Me-Not™ qPCR Master Mix 专为快速循环 PCR 参数而配制,但也可与常规循环协议一起使用。 它的性能与我们的 Fast EvaGreen® 预混液一样好,在实时 PCR 分析中与 Qiagen 的 QuantiNova® SYBR® Green PCR 预混液一样好或更好(图 2),同时让您轻松确保您的反应第一次,每次都正确设置。
EvaGreen® 染料
一种环保、非诱变和非细胞毒性 DNA 结合染料,具有非常适合 qPCR 和高分辨率 Melt® (HRM) 分析的特性。 EvaGreen® Dye 通过一种新的“按需释放”机制与 dsDNA 结合,可防止染料从扩增子转移到扩增子,并允许在 qPCR 中使用相对较高的染料浓度,而不会抑制 PCR。 学习更多关于 用于 qPCR 的 EvaGreen® 染料。
Cheetah™ 热启动 Taq
Cheetah™ HotStart Taq DNA 聚合酶是 Biotium 专有的化学修饰的热启动 DNA 聚合酶。 Cheetah™ Taq 在室温下完全失活,在 2°C 下 95 分钟后完全激活,使其特别适用于快速循环 PCR 方案。
ROX 参考染料
在某些 qPCR 系统中需要 ROX 作为无源参考染料,以补偿孔间光学变化。 有关实时荧光定量 PCR 仪器的被动染料要求,请参阅下表。 产品 #31041 不提供 ROX,而产品 #31042 提供单独的 ROX 小瓶。 对于预混 ROX 的预混液,使用 Forget-Me-Not™ EvaGreen® qPCR Master Mix(低 ROX 或高 ROX)
参考染料 | PCR仪 |
---|---|
低 ROX (〜50纳米) |
Applied Biosystems®:7500、7500 Fast、ViiA™7、Quant-Studio™ 仪器 Stratagene(安捷伦):MX4000P、MX3000P、MX3005P |
高 ROX (〜500纳米) |
Applied Biosystems®:5700、7000、7300、7700、7900、7900HT、7900HT Fast、StepOne™、StepOnePlus™ |
无需 ROX* | BioRad:iCycler™、MyiQ™、MiQ™ 2、iQ™ 5、CFX-96 Touch™、CFX-384 Touch™ 和 Connect™、Chromo4™、MiniOpticon™ Qiagen:Rotor-Gene® Q、Rotor-Gene® 3000、Rotor-Gene®6000 Eppendorf:Mastercycler® Realplex Illumina:Eco™ 实时 PCR 系统 造父变星:SmartCyler® 罗氏:LightCycler® 480、LightCycler® 2.0 |
荧光素** | BioRad:iCycler™、MyiQ™、MiQ™、iQ™ |
*不需要 ROX 参考染料的仪器通常与含有 ROX 的 qPCR 预混液兼容(使用前请咨询制造商)。
**Bio-Rad 的 iCycler™ 用户无需在 PCR 反应中添加荧光素,因为 EvaGreen® 染料具有轻微的背景荧光,可提供足够且稳定的基线水平荧光。