เซลล์ต้นกำเนิดจากเยื่อหุ้มเซลล์ (MSCs) ได้กลายเป็นจุดสนใจในการวิจัยโรคมะเร็ง ไม่เพียงแต่มีศักยภาพในการแยกความแตกต่างออกไปเป็นเซลล์ประเภทต่างๆ เท่านั้น แต่ยังรวมไปถึงความสามารถในการปรับภูมิคุ้มกันที่น่าสนใจอีกด้วย เซลล์ต้นกำเนิดจากเนื้อเยื่ออ่อนของมนุษย์ (hMSCs) ได้มาจากแหล่งเนื้อเยื่อต่างๆ เช่น ไขกระดูก เลือดจากสายสะดือ และเนื้อเยื่อไขมัน ถือเป็นแนวทางในการรักษาโรคมะเร็งที่เป็นนวัตกรรมใหม่
อย่างไรก็ตาม การสร้างจำนวนเซลล์ที่เพียงพอสำหรับการรักษาโดยใช้ MSC เผชิญกับอุปสรรคสำคัญ:
(i) MSCs ที่มีความอุดมสมบูรณ์ต่ำในเนื้อเยื่อต้นกำเนิดจำเป็นต้องมีอย่างมาก ex vivo การขยายตัวของเซลล์
(ii) ลักษณะเฉพาะของผู้บริจาค รวมถึงความถี่และคุณภาพของ MSC ลดลงตามการลุกลามของโรคและอายุ และ
(iii) การชราภาพของเซลล์ ซึ่งส่งเสริมโดยการขยายตัวอย่างกว้างขวาง ส่งผลให้ฟังก์ชันการรักษาลดลง
เมื่อพิจารณาถึงข้อจำกัดในการใช้ hMSC สำหรับการใช้งานทางคลินิก จึงมีความจำเป็นเร่งด่วนในการขยายเซลล์เหล่านี้ ex vivo- ความพยายามนี้ไม่เพียงต้องการวิธีการขยายที่มีประสิทธิภาพและปลอดภัยเท่านั้น แต่ยังต้องมีกลยุทธ์ที่จะรักษาคุณสมบัติที่สำคัญของเซลล์อีกด้วย การเร่งกระบวนการขยายนี้เป็นสิ่งสำคัญในการหลีกเลี่ยงความท้าทาย เช่น ความชราของเซลล์ และการปนเปื้อนที่อาจเกิดขึ้น ซึ่งอาจส่งผลต่อศักยภาพในการรักษาของเซลล์เหล่านี้
ความสำเร็จของการขยาย hMSCs สำหรับการใช้งานที่เกี่ยวข้องกับมะเร็งนั้นขึ้นอยู่กับการเลือกสื่อการเพาะเลี้ยงเซลล์เป็นหลัก องค์ประกอบของอาหารเลี้ยงเชื้อจะต้องมีความสมดุลที่ละเอียดอ่อน โดยให้สารอาหารที่เหมาะสมและปัจจัยการเจริญเติบโตที่ช่วยให้เกิดการแพร่กระจายอย่างรวดเร็ว ในขณะเดียวกันก็รักษาคุณลักษณะโดยธรรมชาติของเซลล์ไว้
เซรั่มวัวในครรภ์ (FBS) ได้ยึดตำแหน่งเป็นสารเติมแต่งในซีรั่มสำหรับ ในหลอดทดลอง การเพาะเลี้ยงเซลล์ในเซลล์ที่หลากหลาย รวมถึง MSC โดยทั่วไปจะถูกเพิ่มลงในสื่อฐาน เช่น s Dulbecco's modified Eagle's medium (DMEM) α- แก้ไขสื่อที่จำเป็นขั้นต่ำ (α-MEM) หรือสื่อ DMEM/F12 ความนิยมของ FBS มาจากคุณสมบัติที่เป็นประโยชน์หลายประการ:
FBS ประกอบไปด้วยโมเลกุลของการยึดเกาะ ปัจจัยการเจริญเติบโต สารอาหารรอง และฮอร์โมน ส่วนประกอบเหล่านี้ร่วมกันสร้างสภาพแวดล้อมที่หล่อเลี้ยง ส่งเสริมการเกาะติด การเจริญเติบโต และการแพร่กระจายของเซลล์ของสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนม รวมถึง hMSC
จากมุมมองทางเศรษฐกิจ FBS นำเสนอโซลูชั่นที่คุ้มค่าสำหรับการเพาะเลี้ยงเซลล์ โดยมีปัจจัยส่งเสริมการเจริญเติบโตที่แข็งแกร่งในราคาที่ค่อนข้างต่ำ
แม้ว่า FBS จะให้สิทธิประโยชน์มากมาย แต่ก็ไม่ได้ปราศจากข้อเสีย ข้อกังวลหลายประการทำให้นักวิจัยและหน่วยงานกำกับดูแลพิจารณาการใช้อย่างแพร่หลายอีกครั้ง:
หนึ่งในความท้าทายที่สำคัญที่เกี่ยวข้องกับ FBS คือความแปรปรวนโดยธรรมชาติระหว่างแบทช์ มันเป็นอาหารเสริมที่ไม่ชัดเจนซึ่งมีความไม่สอดคล้องกันสูงทั้งในด้านคุณภาพและปริมาณของสารประกอบออกฤทธิ์ทางชีวภาพ ความไม่สอดคล้องกันนี้อาจทำให้เกิดความไม่แน่นอนในการทดลองเพาะเลี้ยงเซลล์ อาจทำให้ผลลัพธ์บิดเบือน และทำให้การทำซ้ำมีความซับซ้อน
บางทีในเชิงวิกฤตกว่านั้น ธรรมชาติของซีโนเจนิกของ FBS ก่อให้เกิดความเสี่ยงด้านความปลอดภัย รวมถึงการก่อภูมิคุ้มกันที่อาจเกิดขึ้น และข้อกังวลที่เกี่ยวข้องกับการแพร่เชื้อพรีออน/สัตว์จากสัตว์สู่คน ผลกระทบด้านความปลอดภัยเหล่านี้ทำให้มีการตรวจสอบกฎระเบียบเพิ่มมากขึ้น และกระตุ้นให้เกิดการค้นหาอาหารเสริมทางเลือกที่ปลอดภัยกว่าสำหรับวัฒนธรรม hMSC
เนื่องจากข้อกังวลที่กล่าวมาข้างต้น มีแนวโน้มที่ชัดเจนต่อการใช้วัสดุที่ได้มาจากเลือดมนุษย์แบบออโตโลกัสหรือแบบ allogeneic ซึ่งรวมถึงเซรั่มของมนุษย์ (hS) เซรั่มเลือดจากสายสะดือของมนุษย์ (hUCBS) และเกล็ดเลือดมนุษย์ lysate (hPL)
ซีรั่มของมนุษย์ (HS) ได้รับการแนะนำเป็นทางเลือกแทน FBS HS มีสารประกอบออกฤทธิ์ทางชีวภาพและปัจจัยการเจริญเติบโตมากมายที่สามารถเพิ่มการแพร่กระจายของ hMSC โดยไม่เปลี่ยนแปลงคุณลักษณะและคุณสมบัติเชิงหน้าที่ของมัน
เซรั่มเลือดจากสายสะดือของมนุษย์ (hUCBS) สามารถหาซื้อได้ง่ายหลังการคลอดบุตรตามปกติ ดังนั้นจึงมักตรวจคัดกรองการปนเปื้อนของแบคทีเรียหรือไวรัสที่พบบ่อยที่สุด และการใช้เซรั่มดังกล่าวไม่ได้ทำให้เกิดปัญหาด้านจริยธรรมใดๆ ประกอบด้วยโกรทแฟคเตอร์ที่ละลายน้ำได้ในระดับสูง และมีโปรตีนมากกว่า 60 ชนิด ได้แก่ อัลบูมิน ทรานสเฟอร์ริน และไฟโบรเนคติน ที่มีความเข้มข้นสูง โดยมีบทบาทที่แตกต่างกันในการเจริญเติบโตของเซลล์และการสร้างความแตกต่างของเซลล์ต้นกำเนิด โดยทั่วไป UCBS ถือได้ว่าเป็นข้อได้เปรียบในฐานะอาหารเสริมสำหรับการเพาะเลี้ยงเซลล์ เมื่อพิจารณาถึงแหล่งที่มาของอัลโลจีนิกที่หาได้ง่าย กระบวนการแยกที่ง่ายและราคาไม่แพง และการแทบไม่มีสิ่งปนเปื้อนเลย
เกล็ดเลือดมนุษย์ไลเซต (hPL) สามารถเตรียมจากเลือดได้อย่างง่ายดายโดยใช้ขั้นตอนต่างๆ การปลดปล่อยปัจจัยการเจริญเติบโตออกจากเกล็ดเลือดถือเป็นจุดสำคัญในการผลิต hPL hPL มีปัจจัยการเจริญเติบโตที่มีความเข้มข้นสูงกว่า เช่น ปัจจัยการเจริญเติบโตของผิวหนังชั้นนอก (EGF) ปัจจัยการเจริญเติบโตของตับ (HGF) ปัจจัยการเจริญเติบโตที่ได้มาจากเกล็ดเลือด (PDGF) ปัจจัยการเจริญเติบโตของไฟโบรบลาสต์พื้นฐาน (bFGF) การเปลี่ยนแปลงปัจจัยการเจริญเติบโตเบต้า (TGF-ß1 ) และปัจจัยการเจริญเติบโตของเยื่อบุหลอดเลือด (VEGF) มากกว่า HS และ FBS นี่อาจเป็นเหตุผลว่าทำไมรายงานส่วนใหญ่จึงเห็นพ้องกันว่า hPL รองรับการขยายเซลล์ในระดับที่สูงกว่า เมื่อเปรียบเทียบกับ FBS และ HS
เพื่อแก้ไขข้อจำกัดที่เกี่ยวข้องกับการใช้ซีรั่มหรือผลิตภัณฑ์เสริมอาหารที่มนุษย์กำหนดไว้ไม่ดีในการเพาะเลี้ยงเซลล์ จึงมีการเปลี่ยนแปลงไปสู่การนำสื่อที่มีการกำหนดทางเคมี (CD) ที่มีสูตรแม่นยำมากขึ้น ตัวกลางเหล่านี้แสดงคุณลักษณะเฉพาะโดยส่วนประกอบทางเคมีที่กำหนดไว้อย่างดี ซึ่งรวมถึงโมเลกุลขนาดเล็ก, เกลือ, กรดไขมัน และยังอาจรวมเอาโปรตีนรีคอมบิแนนท์ที่ไม่ได้ถูกสร้างในสัตว์เข้าไว้ด้วย
แม้ว่าสื่อซีดีจะมีข้อได้เปรียบ แต่ก็มักจะขาดโมเลกุลการยึดเกาะที่จำเป็นสำหรับ MSC ที่ขึ้นกับจุดยึด ด้วยเหตุนี้ ตัวเลือกสื่อซีดีที่มีอยู่จำนวนมากจึงจำเป็นต้องมีซับสเตรตสำหรับการเพาะเลี้ยงล่วงหน้าด้วยโปรตีน Extracell Matrix (ECM) เช่น คอลลาเจน, ไฟโบรเนคติน, ไวโตรเนคติน หรือลามินิน เพื่อช่วยให้เซลล์เกาะติดได้ง่ายขึ้น การเคลือบล่วงหน้านี้รับประกันการเกาะติดและการเจริญเติบโตของ hMSC คล้ายกับการเพาะเลี้ยงที่ประกอบด้วยซีรัม และรักษา MSC multipotency อย่างไรก็ตาม โปรตีน ECM เหล่านี้ โดยทั่วไปมาจากมนุษย์หรือสัตว์ ทำให้เกิดข้อกังวลที่เกี่ยวข้องกับความแปรปรวนแบบแบตช์ต่อแบตช์ ข้อมูลไม่เพียงพอเกี่ยวกับปริมาณโปรตีน ศักยภาพในการสร้างภูมิคุ้มกัน และเกี่ยวข้องกับขั้นตอนการเคลือบที่ใช้เวลานาน
สิ่งสำคัญที่ควรทราบคือสื่อซีดีอาจไม่ได้ให้การเจริญเติบโตของเซลล์ที่เหมาะสมอย่างสม่ำเสมอเมื่อเปรียบเทียบกับสื่อที่เสริมด้วยเซรั่มหรืออาหารเสริมอื่นๆ ที่ได้จากสัตว์ สิ่งนี้เน้นย้ำถึงความสำคัญอย่างต่อเนื่องของการวิจัยและความพยายามในการเพิ่มประสิทธิภาพในการปรับปรุงสูตรสื่อซีดีเพื่อให้บรรลุผลลัพธ์ที่แข็งแกร่งและสม่ำเสมอมากขึ้นในการเพาะเลี้ยงเซลล์
มีสื่อ MSC หลายสูตร รวมถึงตัวเลือกที่ปราศจากซีโน ปราศจากสัตว์ และปราศจากซีรั่ม มีจำหน่ายในท้องตลาด อย่างไรก็ตาม คำเหล่านี้มักทำให้เกิดความสับสนและไม่สอดคล้องกันในการตีความ
โดยทั่วไปปลอดสารซีโนได้รับการยอมรับว่าเป็นสูตรที่ปราศจากส่วนประกอบของสัตว์ที่ไม่ใช่มนุษย์ แต่ยังคงอาจรวมองค์ประกอบที่ได้มาจากมนุษย์ เช่น ซีรั่มของมนุษย์ โฮโล-ทรานสเฟอร์ริน หรืออินซูลิน ในทางตรงกันข้าม สื่อที่ปราศจากสัตว์จะไม่รวมส่วนประกอบใดๆ ที่ได้มาจากสัตว์โดยตรง รวมถึงมนุษย์ด้วย โดยทั่วไปแล้ว ปราศจากเซรั่มจะบ่งชี้ถึงตัวกลางที่ไม่มีเซรั่มหรือพลาสมา แม้ว่าอาจยังมีวัสดุทางชีวภาพอื่นๆ เช่น เกล็ดเลือดไลเซต ปัจจัยการเจริญเติบโต หรืออัลบูมิน
โดยสรุป ความมั่งคั่งของข้อมูลที่มีอยู่เน้นย้ำถึงความเหนือกว่าของผลิตภัณฑ์เสริมอาหารที่ได้จากมนุษย์มากกว่า FBS ไม่เพียงแต่จัดการกับข้อเสียทั่วไปเท่านั้น แต่ยังเหนือกว่าในด้านประสิทธิภาพการขยาย MSC อีกด้วย การเข้าใจความซับซ้อนของตัวเลือกสื่อและอาหารเสริมเหล่านี้ถือเป็นสิ่งสำคัญสำหรับนักวิจัยเมื่อต้องสำรวจภูมิทัศน์ของการกำหนดสูตรให้เหมาะสมที่สุด ข้อมูลเชิงลึกที่ชัดเจนว่าเมื่อใดควรใช้ค็อกเทลเฉพาะเจาะจงจะเพิ่มประสิทธิภาพและความเกี่ยวข้องของความพยายามในการวิจัยของคุณได้อย่างมาก
Our สเตมโกลด์ ปริญญาโท สื่อประสิทธิภาพสูงมีความโดดเด่นในฐานะสื่อ MSC ที่ดีที่สุดในระดับเดียวกัน โดยนำเสนอความสามารถที่เหนือกว่าและมีประสิทธิภาพสูงสำหรับการขยาย hMSC ข้ามสายผลิตภัณฑ์ที่หลากหลาย สื่อที่ล้ำสมัยนี้รักษาศักยภาพในการสร้างความแตกต่างแบบไตรไลน์เอจของ hMSC และเป็นไปตามเกณฑ์ ISCT
สิ่งที่ทำให้มันแตกต่างคือสูตรที่ผลิตขึ้นตามมาตรฐาน GMP ซึ่งลดความผันแปรของล็อตต่อล็อตและเพิ่มความสามารถในการทำซ้ำในการทดลอง โดยเฉพาะอย่างยิ่ง STEMGOLD MSC ขจัดความจำเป็นในการเคลือบล่วงหน้า และทำให้กระบวนการขยายสำหรับ hMSC คล่องตัวขึ้น ด้วยคุณสมบัติพิเศษ อาหารสื่อนี้แสดงถึงความก้าวหน้าที่สำคัญในเทคโนโลยีการเพาะเลี้ยงเซลล์ ทำให้นักวิจัยได้รับโซลูชันที่เชื่อถือได้และมีประสิทธิภาพสำหรับการศึกษาเซลล์ต้นกำเนิด
อ้างอิง:
ชิมิโน เอ็ม, กอนซัลเวส อาร์เอ็ม, บาร์เรียส ซีซี, มาร์ตินส์ เอ็มซีแอล กลยุทธ์ปลอดสารซีโนสำหรับการขยายต้นกำเนิดมีเซนไคมัล/เซลล์สโตรมอลของมนุษย์อย่างปลอดภัย: อาหารเสริมและสารเคลือบ สเต็มเซลล์นานาชาติ 2017;2017:6597815. ดอย: 10.1155/2017/6597815.
กุยอตโต เอ็ม, ราฟฟูล ดับบลิว, ฮาร์ท เอเอ็ม, รีห์ล โม, ซุมมา พีจี เกล็ดเลือดมนุษย์ lysate เพื่อทดแทนซีรั่มวัวของทารกในครรภ์ในการขยาย hMSC สำหรับการใช้งานเชิงแปล: การทบทวนอย่างเป็นระบบ เจ แปล เมด. 2020 ก.ย. 15;18(1):351. ดอย: 10.1186/s12967-020-02489-4.
Mushahary D, Spittler A, Kasper C, Weber V, Charwat V. การแยก การเพาะปลูก และลักษณะเฉพาะของเซลล์ต้นกำเนิดจากเยื่อหุ้มเซลล์ของมนุษย์ ไซโตเมทรี เอ. 2018;93(1):19-31. ดอย:10.1002/cyto.a.23242
เชื่อมต่อกับผู้เชี่ยวชาญด้านเทคนิคของเรา
ขอใบเสนอราคา
อนาคตมีความยืดหยุ่น: สรุป ความแข็งของพื้นผิวทำหน้าที่เป็นปัจจัยกำหนดที่สำคัญของพฤติกรรม MSC ซึ่งส่งผลกระทบอย่างลึกซึ้งต่อการยึดเกาะ การแพร่กระจาย การโยกย้าย และความแตกต่าง ความเข้าใจ
การใช้เซลล์ต้นกำเนิดจากเยื่อหุ้มเซลล์ (MSC) ในการทดลองทางคลินิก พบว่ามีกระแสเพิ่มขึ้นทั่วโลก ส่งผลให้ MSC เป็นหนึ่งในเซลล์ที่สร้างใหม่ที่เป็นที่ต้องการมากที่สุด
สำรวจว่าเหตุใดการตรวจสอบย้อนกลับของ FBS จึงมีความสำคัญในการวิจัยโรคมะเร็ง เรียนรู้เกี่ยวกับการรับรอง ISIA และผลิตภัณฑ์เซรั่มที่เชื่อถือได้เพื่อผลลัพธ์ที่เชื่อถือได้
ติดต่อฝ่ายดูแลลูกค้า การขาย และความช่วยเหลือด้านวิทยาศาสตร์ของเรา
ปรึกษาและถามคำถามเกี่ยวกับผลิตภัณฑ์และบริการของเรา
เอกสารประกอบเอกสารข้อมูลทางเทคนิคและความปลอดภัย คำแนะนำ และอื่นๆ