EvaGreen® qPCR 염료, Cheetah™ HotStart Taq Polymerase 및 Forget-Me-Not™ 추적 염료를 포함하는 고성능 염료 기반 qPCR 마스터 믹스. 낮거나 높은 ROX.

2X Forget-Me-Not™ EvaGreen® qPCR 마스터 믹스는 qPCR 및 DNA 용융 곡선 분석을 위해 바로 사용할 수 있는 고성능 염료 기반 마스터 믹스입니다. 2X 마스터 믹스에는 EvaGreen® 염료, 사전 혼합된 ROX, Cheetah™ HotStart Taq DNA 중합효소, dNTP 및 저농도의 Forget-Me-Not™ 파란색 추적 염료가 포함되어 있습니다.

• 바로 사용 가능, 프라이머와 DNA 템플릿만 추가하기만 하면 됩니다.
• SYBR® Green I 및 기타 상용 PCR 염료보다 더 민감한 당사의 우수한 EvaGreen® Dye로 최적화
• Forget-Me-Not™ 라이트 블루 마스터 믹스로 샘플 낭비 및 기타 값비싼 실수 방지
• ROX와 사전 혼합되고 고농도 또는 저농도의 ROX 참조 염료가 필요한 기기에 최적화됨
• 빠른 사이클링 프로토콜을 위해 Cheetah™ HotStart Taq로 제조
• 증폭 산물을 젤로 직접 시각화

Forget-Me-Not™ 색상 추적

파이펫팅 실수를 포착하고 시간, 시약 및 귀중한 DNA 샘플을 낭비하지 마십시오. Forget-Me-Not™ EvaGreen® qPCR 마스터 믹스는 사전 혼합된 ROX와 밝은 파란색을 띠므로 반응 혼합물이 들어 있는 튜브/웰을 빈 튜브/웰과 쉽게 구별할 수 있습니다(그림 1). 이 제품은 단일 색상 추적을 사용하려는 사용자를 위한 것입니다. 우리는 또한 제공합니다 Forget-Me-Not™ EvaGreen® qPCR 마스터 믹스(2색 추적) 마스터 믹스와 템플릿 솔루션 모두의 색상 추적을 허용합니다.

마음의 평화 플러스 PCR 성능

Forget-Me-Not™ qPCR 마스터 믹스는 빠른 사이클링 PCR 매개변수를 위해 공식화되었지만 일반 사이클링 프로토콜과 함께 사용할 수도 있습니다. Forget-Me-Not™ qPCR Master Mix는 Fast EvaGreen® Master Mix와 같은 성능을 발휘하며, 실시간 PCR 분석에서 Qiagen의 QuantiNova® SYBR® Green PCR Master Mix와 같거나 그 이상입니다(그림 2). 매번 처음에 반응이 올바르게 설정되었는지 쉽게 확인할 수 있습니다.

EvaGreen® 염료

qPCR 및 고분해능 Melt®(HRM) 분석 모두에 이상적인 기능을 갖춘 환경 친화적이고 돌연변이 유발성 및 세포독성이 없는 DNA 결합 염료(Ref. 3). EvaGreen® Dye는 새로운 "release-on-demand" 메커니즘을 통해 dsDNA에 결합합니다. 이 메커니즘에서는 DNA를 사용할 수 있을 때까지 염료가 비활성 형태를 유지합니다. DNA가 PCR 과정에서 생성됨에 따라 염료는 DNA에 결합하여 형광을 발하는 활성 형태로 이동합니다. 결과적으로 EvaGreen® Dye는 SYBR® Green I보다 qPCR에서 훨씬 더 높은 염료 농도로 사용할 수 있습니다(Ref. 1). 염료는 여기 및 방출 스펙트럼이 플루오레세인(FAM) 또는 SYBR® Green I에 매우 근접하여 488nm 아르곤 레이저 또는 해당 영역의 파장을 갖는 가시광 여기가 장착된 기기와 쉽게 호환됩니다. EvaGreen® 증폭 제품은 다른 DNA 젤 염색 없이 젤에서 직접 검출할 수 있습니다.

독립적인 실험실에서 EvaGreen® 염료는 돌연변이가 없고 세포독성이 없으며 배수구에 직접 처분할 수 있어 수생 생물에게 안전하다는 것을 확인했습니다. 다른 상용 PCR 염료는 몇 분 안에 세포에 들어갑니다. 예를 들어 SYBR® Green I은 잘 알려진 돌연변이 유발원인 ethidium bromide보다 환경적으로 더 독성이 강한 것으로 나타났습니다(Ref. 2). 자세한 내용은 EvaGreen® 염료 안전 보고서.

전단지에 포함된 링크에 대해 더 알아보기 qPCR용 EvaGreen® 염료.

Cheetah™ HotStart Taq

Cheetah™ HotStart Taq DNA 중합효소는 Biotium의 독점적인 화학적으로 변형된 핫스타트 DNA 중합효소입니다. Cheetah™ Taq는 실온에서 완전히 비활성화되고 2°C에서 95분 후에 완전히 활성화되어 고속 사이클링 PCR 프로토콜에 특히 적합합니다.

ROX

Forget-Me-Not™ EvaGreen® qPCR Master Mix with Premixed ROX는 낮은 ROX 마스터 믹스(분석에서 ~50nM 최종 ROX 농도)와 높은 ROX 마스터 믹스(~500nM 최종 분석 농도)의 두 가지 제형으로 제공됩니다. ROX는 well-to-well 광학적 변화를 보상하기 위해 일부 qPCR 시스템에서 수동 참조 염료로 필요합니다. Real-Time PCR 기기의 수동 염료 요구 사항은 아래 표를 참조하십시오.

*ROX 참조 염료가 필요하지 않은 기기는 일반적으로 ROX가 포함된 qPCR 마스터 믹스와 호환됩니다(사용하기 전에 제조업체에 확인). 우리는 또한 판매 Forget-Me-Not™ EvaGreen® qPCR 마스터 믹스 키트(ROX 제외)(cat# 31041) 및 ROX의 별도 튜브 포함(cat# 31042) 자신의 로우 또는 하이 ROX 마스터 믹스를 만드는 데 사용할 수 있습니다.
**Bio-Rad의 iCycler™ 사용자는 PCR 반응에 플루오레세인을 추가할 필요가 없습니다. EvaGreen® 염료는 적절하고 안정적인 베이스라인 수준 형광을 제공하는 약간의 배경 형광을 가지고 있기 때문입니다. 이러한 기기의 경우 다음을 사용하는 것이 좋습니다. ROX가 없는 Forget-Me-Not™ EvaGreen® qPCR 마스터 믹스(cat# 31041).